所謂“雜菌”， 是指在發(fā)酵培養(yǎng)中侵入了有礙生產(chǎn)的其他微生物。幾乎所有的發(fā)酵工業(yè)，都有可能遭受雜菌的污染。染菌的結果，輕者影響產(chǎn)量或產(chǎn)品質(zhì)量，重者可能導致倒罐，甚至停產(chǎn)。因此發(fā)酵罐滅菌過程中要注意以下幾點事項： 

1、蒸汽和滅菌操作        

罐壓1公升/厘米2，料溫120℃并維持一定時間是一般實罐滅菌(即培養(yǎng)基的分批滅菌)的操作規(guī)范。根據(jù)操作經(jīng)驗，能否達到徹底滅菌的目的在于罐內(nèi)壓力能否控制得與應該達到的溫度相對應，例如罐壓已達到1公斤/厘米2而料溫卻并未達到120℃，則某些耐熱的細菌芽孢就難以完全殺死。產(chǎn)生罐壓和料溫不相對應的情況是由于操作不合理所致，例如在滅菌開始時沒有將罐內(nèi)冷空氣排除干凈，蒸汽中摻入了冷空氣使蒸汽的分壓降低，蒸汽壓力實際上沒有達到1公斤/厘米2因而料溫也就達不到120℃。       

為了加快加熱時間，凡能進蒸汽的管路在滅菌時都可同時進汽，但各管路的阻力不同，大量蒸汽從阻力小的進汽管中沖入罐內(nèi)，這是一種蒸汽短路現(xiàn)象，使物料受熱不勻，部分培養(yǎng)液過熱而部分培養(yǎng)液則可能滅菌不透，尤其是罐底的空氣分布管是主要的進汽口，但由于液柱壓力較大，阻力就比其他進口大，所以在滅菌操作時應將空氣分布管的進口閥門開得比其他進氣口的閥門大一些，以保證有足夠的蒸汽從空氣分布管進入，促使培養(yǎng)液激烈翻動起攪拌混和作用。     

滅菌蒸汽要求采用飽和蒸汽，冷凝水越少越好，冷凝水多，熱量的穿透力就差，在冷凝水較多或蒸汽管道較長的情況下，蒸汽進車間后的總管上要裝設汽水分離裝置將冷凝水分離后再使用�？傊�，滅菌時蒸汽壓力要求平穩(wěn)，在壓力變動較大時，操作人員需靈活掌握加以控制。 

2、泡沫問題        

實踐證明：滅菌時泡沫嚴重的，就不易滅透。所以在發(fā)生泡沫時應加以清除(加消泡劑和在操作上予以控制)。    

發(fā)生泡沫的培養(yǎng)基滅菌不透的原因可能是由于某些耐熱細菌潛伏在泡沫里，泡沫中的空氣和泡沫的薄膜有隔熱作用，熱量不易穿透進去殺死其中潛伏的菌，一旦泡沫破裂，這些菌就被釋出造成污染。 

3、其他操作問題       

實罐滅菌時，當經(jīng)過加熱和維持時間后開始冷卻，此時可能因蒸汽冷凝而使罐壓突然降低甚至會形成真空，所以此時必須將無菌空氣通入罐內(nèi)保持一定壓力，并注意壓力變化，隨時進行調(diào)節(jié)。       

對于中小型發(fā)酵罐，一般經(jīng)空罐滅菌(1.5公斤/厘米2，15分鐘)后再將培養(yǎng)基放入罐內(nèi)進行實罐滅菌。有些工廠為了節(jié)約蒸汽，直接進行實罐滅菌而不進行空罐滅菌，他們只有在檢修后或在節(jié)日停工后以及春夏季節(jié)發(fā)酵罐空置了24小時以上時才進行空罐滅菌。這種方法如果操作上注意是完全可行的，也是一種節(jié)約燃料的有效措施。     

 

 

大型發(fā)酵罐大多采用連續(xù)滅菌，這時空罐需先行滅菌。但也有在發(fā)酵完畢后，將空罐保壓不滅菌就進連消好的培養(yǎng)基，這要根據(jù)各廠的生產(chǎn)菌株特性和生產(chǎn)設備等具體情況而定。對于發(fā)酵周期短的菌株、突變影響小的發(fā)酵，采用保壓不進行空罐滅菌的辦法是可行的，但經(jīng)一定發(fā)酵批數(shù)后仍需定期進行空罐滅菌，否則較難避免雜茵污染與遺傳突變的影響。