常用的無菌技術(shù)和方法主要有以下幾種，可根據(jù)滅菌的對(duì)象和要求選用不同方法。 

一、干熱滅菌法 

1.火焰滅菌法 

火焰滅菌法即利用火焰直接將微生物燒死，主要用于金屬接種工具、試管口、錐形瓶口、接種行色匆匆 液管和滴管外部及無用的污染物（如稱量化學(xué)誘變劑的稱量紙）等的滅菌。對(duì)金屬小鑷子、小刀、玻璃涂棒、載玻片、蓋玻片滅菌時(shí)，應(yīng)先將其浸泡在75%酒精溶液中，使用時(shí)從酒精溶液中取出來，迅速通過火焰，瞬間灼燒滅菌。該方法簡(jiǎn)單，滅菌徹底，但適用范圍有限。 

2.干熱空氣滅菌法 

干熱空氣滅菌法是指用高溫干熱空氣滅菌的方法。該法適用于耐高溫的玻璃和金屬制品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂等方面的滅菌，不適合橡膠，塑料及大部分藥品的滅菌。 在干熱狀態(tài)下，由于熱穿透力較差，微生物的耐熱性較強(qiáng)，必須長時(shí)間受高溫的作用才能達(dá)到滅菌的目的。因此，干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。為了保證滅菌效果，通常采用以下幾種方法：135~140℃滅菌3~5h；160~170℃滅菌2~4h；180~200℃滅菌0.5~1h。 

二、濕熱滅菌法 濕熱滅菌法是指用飽和水蒸汽、沸水或流通蒸汽進(jìn)行滅菌的方法，由于蒸汽潛熱大，具有很強(qiáng)的穿透能力，而且在冷凝時(shí)會(huì)放出大量熱能，使微生物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、酶和核酸分子內(nèi)部的化學(xué)鍵，特別是氫鍵受到破壞，引起不可逆的變性，造成微生物死亡。從滅菌的效果來看，干熱滅菌不如濕熱滅菌有效，干熱滅菌溫度每升高10℃時(shí)，滅菌速率常數(shù)僅增加2~3倍；而濕熱滅菌對(duì)耐熱芽孢的滅菌速率常數(shù)增加的倍數(shù)可達(dá)到8~10倍，對(duì)營養(yǎng)細(xì)胞則速率常數(shù)增加得更高（通常濕熱滅菌條件為121℃，維持30min）。所以該法的滅菌效率比干熱滅菌法高且經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，是生產(chǎn)上常用的滅菌方法，已被廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)中大量培養(yǎng)基、設(shè)備、管路及閥門的滅菌。影響濕熱滅菌方法的主要因素有：微生物的各類與數(shù)量、蒸汽的性質(zhì)和滅菌時(shí)間等。濕熱滅菌法可分為：煮沸滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法、流通蒸汽滅菌法和間歇蒸汽滅菌法。 

1.煮沸滅菌法 煮沸滅菌法即將水煮沸至100℃，保持5~10min可殺死細(xì)菌繁殖體，保持1~3h可殺死芽孢。在水中加入1~2%的碳酸氫鈉時(shí)沸點(diǎn)可達(dá)105℃，能增強(qiáng)殺菌作用，還可去污防銹。此法適用于食具、刀剪及載玻片等。 

2.巴氏消毒法 巴氏消毒法是指溫度比較低的嫌麻煩處理方法，一般在低于水沸點(diǎn)溫度下進(jìn)行。殺菌條件為61~63℃，30min，或72~75℃，10~15min。加熱時(shí)應(yīng)注意物料表面溫度較內(nèi)部溫度低4~5℃；此外，當(dāng)表面產(chǎn)生氣泡時(shí)，泡沫部分難以達(dá)到殺菌要求。這種殺菌方法，由于所需時(shí)間長，生產(chǎn)過程不連續(xù)，長時(shí)間受熱容易使某些熱敏成分變化，殺菌也不夠理想。 

 

 

 

3.流通蒸汽滅菌法 流通蒸汽滅菌法，利用直接加熱的流通水蒸汽殺菌微生物的方法。本法適用于瓷制、金屬制、橡膠制、纖維制的物品、水、培養(yǎng)基和試驗(yàn)液等的滅菌。用干熱滅菌法或高壓蒸汽滅菌法，物品有變質(zhì)危險(xiǎn)，所以滅菌的時(shí)間要控制適當(dāng)。